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血清沉淀不要怕?

時間:2019/10/28 10:17:36 | 瀏覽次數:

 

什么是血清沉淀?
血清中有多種類型的可見沉淀,原因很多,主要是纖維蛋白、磷酸鈣和其他一些成分。
1. 纖維蛋白(Fibrin)
血清中大多數可見的沉積物屬于這種類型。在生產過程中,血清收集、過濾(0.1μ m過濾的3倍)和灌裝處理均在低溫下快速完成,此時血清中的纖維蛋白原處于溶解狀態。然而,血清中的纖維蛋白原在解凍后傾向于凝集,形成可見的沉淀。
2. 磷酸鈣(Calcium Phosphate)
這是常見的沉淀成分,通常在血清中產生云霧狀混濁。當產品儲存在37℃時,這種現象尤其明顯,在倒置顯微鏡下可以觀察到小黑點的存在。這些小黑點在布朗運動的作用下四處游動,經常被誤認為是微生物污染。
3. 其他成分(Other) 
血清中其他成分也沉淀,例如由膽固醇形成油脂滴或其他蛋白沉淀等
血清沉淀會影響細胞培養嗎?
1. 細胞生長
出廠前,我們將對血清進行一系列質量檢測,以確保血清質量符合嚴格標準。血清試驗和細胞培養經驗也表明,其沉淀成分不會影響血清作為細胞培養添加劑的性能。許多客戶和其他血清供應商都證實了這一點。解凍后,血清中的纖維蛋白原傾向于凝集并形成可見的沉淀。
2. 懷疑污染
磷酸鈣顆粒通常被認為是微生物污染,會引起不必要的擔憂。正常情況下,當操作人員在融化血清后注意到霧狀混濁時,他們通常將其儲存在4℃的冰箱中觀察,并考慮下一步是否繼續使用。但是,如果沉淀更多的話,血清反而會變得渾濁,誤以為是有血清污染。另外,倒置顯微鏡可以觀察到血清中游動的黑點(磷酸鈣粒子的布朗運動),容易誤認為有微生物污染。
為了防止這種誤解的發生,我們不建議客戶培養血清來驗證是否有污染,而是直接將血清接種在細菌培養基上進行培養,觀察是否有細菌增殖。進一步進行革蘭氏染色,用油鏡( 100x10倍)觀察,可以直接確認有無微生物污染。
怎樣操作可以盡量避免沉淀出現?
1. 正確解凍
首先,必須正確解凍血清,使血清慢慢解凍。 從-20℃取出后,放入4℃冰箱慢慢解凍,最后在室溫下解凍。如果直接從-20℃到室溫或在37℃水浴中解凍,容易發生沉淀。在解凍過程中,請注意時不時緩慢搖晃瓶子,減少沉淀的產生。為了避免反復凍融,建議您單獨使用血清。
2. 使用和保存注意事項
血清沉淀難以預測和避免,沉淀后無需擔心,不會影響血清質量。眾所周知,在以下情況下血清沉淀可能會增加:
1) 熱滅活;
2) 37℃培養;
3) 反復凍融;
4) 伽馬射線照射; 
5)在2-8℃下長期保存;
6) 長期保存于可自動化霜的冰箱中(溫度不穩定)。
血清沉淀的形成機制多種多樣,具體機制尚不十分清楚。我們仍然不能準確預測和控制血清沉淀的產生。目前市場上所有品牌的血清產品都有沉淀現象,這可以從各品牌官方網站上關于沉淀問題的陳述中得到證實。
出現血清沉淀該如何處理?
建議以2000 rpm 離心5分鐘。 如果去掉上清液使用的話,比過濾更方便,不需要另外準備過濾心和針筒,不易污染。
總 結:
血清產品中沉淀是一種常見現象,但它不會影響血清質量,而且細胞培養也沒有問題,所以您可以放心使用!


 

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